大鼠急性酒精性肝損傷模型的探究

　　摘要：目的 探索一種相對高效可靠的方法制作大鼠酒精性肝損傷模型。 方法 16只雄性SD大鼠隨機(jī)分為2組。 對照組飲用生理鹽水;實(shí)驗(yàn)組飲用52%的紅星二鍋頭14天，記錄大鼠情況;處死后對肝組織和血液進(jìn)行檢查。結(jié)果 14天后，實(shí)驗(yàn)組與肝功相關(guān)的“前膽紅素、直接膽紅素、前白蛋白、視黃醇結(jié)合蛋白和總膽汁酸”5個(gè)指標(biāo)均出現(xiàn)明顯異常，肝臟均出現(xiàn)腫大，肝竇變窄，表面可見白色點(diǎn)狀變化。結(jié)論 該模型操作簡便，發(fā)病過程與臨床類似，為公共衛(wèi)生領(lǐng)域?qū)ふ矣行У尼槍凭愿螕p傷的防治方法以及藥物治提供較好模型。

　　關(guān)鍵詞：急性;酒精性;肝損傷;動物模型;大鼠

　　酒精濫用與依賴日益嚴(yán)重已成為世界性公共衛(wèi)生問題[1]。 長期大量飲酒易導(dǎo)致酒精性肝病(alcoholic liver disease，ALD)，早期表現(xiàn)為脂肪肝，可發(fā)展為酒精性肝炎、肝纖維化及肝硬化[2]。不同的酒精對肝臟的損傷也有差異[3]。暴食和禁食對肝臟的損傷更為嚴(yán)重，嚴(yán)重酗酒可造成廣泛肝細(xì)胞壞死甚至肝衰竭，選擇與人類 ALD 相似的動物模型對研究其發(fā)病機(jī)制具有重要意義[4]。急性酒精性肝損傷是因短時(shí)間連續(xù)大量飲用含乙醇的飲品所導(dǎo)致的肝臟損傷性病變，嚴(yán)重時(shí)能導(dǎo)致酒精中毒死亡。酒精，這一因素已經(jīng)成為了在病毒性肝炎之后的，導(dǎo)致肝損傷的第一罪魁禍?zhǔn)譡5]。因此，酒精性肝損傷模型對酒精性脂肪肝的防治具有重要意義。

　　1材料與方法

　　1.1 材料

　　清潔級的SD雄性大鼠16只(均來自于西南醫(yī)科大學(xué)城北實(shí)驗(yàn)動物中心)，空腹體重180-260g。

　　1.2主要試劑

　　52%紅星二鍋頭(北京正通榮合商貿(mào)有限公司);氯化鈉注射液(四川美文康佳樂藥業(yè)股份有限公司);甲醛溶液(成都金山化學(xué)試劑有限公司)緩沖液。

　　1.3實(shí)驗(yàn)環(huán)境

　　實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)為西南醫(yī)科大學(xué)城北校區(qū)動物實(shí)驗(yàn)中心2樓11實(shí)驗(yàn)室，濕度40%～70%，室溫20℃～25℃，大鼠飼養(yǎng)在無毒、耐高溫、耐高壓、耐腐蝕的飼養(yǎng)籠中，每天更換飼料，隔日更換墊料，自由飲用干凈水。

　　1.4 實(shí)驗(yàn)方法

　　1.4.1動物分組及處理

　　使用大鼠16只，任意分成兩個(gè)組(每組8只)，作為實(shí)驗(yàn)組和空白對照組。實(shí)驗(yàn)組每天禁食不禁水十個(gè)小時(shí)(早上8時(shí)禁食，下午6點(diǎn)灌胃)后給予濃度為52%的紅星二鍋頭，1ml/100g.d， 空白對照組則使用1ml/100g.d的生理鹽水灌胃，兩個(gè)小時(shí)后恢復(fù)進(jìn)食。

　　1.4.2觀察記錄

　　每日上、下午各觀察一次，實(shí)驗(yàn)條件同前，連續(xù)觀察14天，記錄動物的外觀、飲食、行為、活動度、空腹體重、有否死亡等情況。

　　1.4.3標(biāo)本采集與處理

　　在第15天的時(shí)候，采用頸椎脫臼致死法對大鼠進(jìn)行處死，取出兩個(gè)小組的大鼠的肝，收集血液之后取肝組織放在10%中性福爾馬林中固定，等著做組織病理、免疫組織化學(xué)檢測。隨后在兩個(gè)小組的大鼠肝左葉同一部位取一大鼠塊肝組織，緩沖溶液和10%甲醛溶液固定。經(jīng)過常規(guī)脫水、石蠟包埋、切片，行HE染色后，在光鏡下觀察。評估肝臟的脂肪變性程度。并將采集的血液進(jìn)行生化分析。

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