肺炎鏈球菌（Streptococcuspneumoniae，S.pn）的致死率較高，由于其具有多重耐藥菌，臨床治療始終很難攻克這一道難關(guān)。因此，只有不斷的進(jìn)行深入研究，探討其毒力基因的發(fā)病機(jī)制及存在情況，從而開發(fā)出更加完善的抗病疫苗。筆者對(duì)臨床分離出的91株肺炎鏈球菌作為研究對(duì)象，現(xiàn)將取得的試驗(yàn)進(jìn)展報(bào)告如下。

1資料與方法

1.1一般資料：選取2007年3月～2012年4月臨床分離出的91株肺炎鏈球菌，其中痰培養(yǎng)75株，血培養(yǎng)10株，分泌物培養(yǎng)4株，腦脊液培養(yǎng)2株。

1.2檢測(cè)方法：采用PCR法進(jìn)行毒力基因的檢測(cè)，PCR產(chǎn)物都要經(jīng)過百分之一瓊脂糖凝膠電泳，然后再使用Bio-Rad紫外凝膠成像分析儀進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)檢測(cè)到的陽性率分別進(jìn)行記錄以及分析。

2結(jié)果

在全部的91株肺炎鏈球菌中LytA、PsaA、NanA、PspA、Ply這5種基因的檢測(cè)陽性率分別為94.5%、85.7%、85.7%、61.5%、82.4%。詳見表1。檢測(cè)結(jié)果見圖1～5。3討論抗S.pn感染的候選蛋白疫苗的主要是其毒力因子，如肺炎球菌溶血素（Pneumolysin，Ply），S.pn表面蛋白A（PneumococealsurfaceproteinA，PspA），S.pn表面黏附素A（PneumococcalsurfacaadhesinA，PsaA）、自溶素（Autolysin，Lyt）等，具有這些蛋白質(zhì)的獨(dú)立或聯(lián)合疫苗在S.pn感染疾病的發(fā)病機(jī)制中起到了重要的作用[1]。因此，了解S.pn毒力因子的存在情況及致病機(jī)制對(duì)有助于對(duì)疫苗的研究。

Lyt在正常情況是無活性的，當(dāng)S.pn菌體細(xì)胞壁合成停止或營(yíng)養(yǎng)不足或抗生素處理時(shí)，Lyt便從LTA上分離，作用于細(xì)胞壁的N-乙酰胞壁酸和丙氨酸之間的共價(jià)鍵，水解CW為糖鏈和肽鏈，導(dǎo)致細(xì)胞溶解[2]。NanA可分解細(xì)胞表面或體液中的多糖、糖蛋白、低聚糖上的唾液酸殘基，暴露宿主細(xì)胞表面的S.pn黏附受體，從而促進(jìn)細(xì)菌的黏附[3]。PsaA是各型S.pn共有的一種遺傳保守的、種特異性的表面蛋白抗原，具有較好的免疫原性，在S.pn黏附呼吸道黏膜過程中起關(guān)鍵作用，可用于S.pn疾病的免疫診斷[4]。

PspA是S.pn重要的毒力因子，其主要作用是與乳鐵蛋白結(jié)合使其喪失功能并抑制補(bǔ)體活化，降低C3b在S.pn表面的沉淀從而干擾補(bǔ)體介導(dǎo)的吞噬調(diào)理作用，而吞噬調(diào)理作用被認(rèn)為是宿主清除S.pn最主要的途徑[5]。Ply是一種胞內(nèi)蛋白，分子量52kDa，屬于膽固醇結(jié)合毒素類，Ply可與細(xì)胞膜表面的膽固醇結(jié)合，插入脂質(zhì)雙分子層，然后通過蛋白質(zhì)的寡聚化作用形成跨膜孔，使細(xì)胞溶解[6]。

本組以肺炎鏈球菌作為研究對(duì)象，利用PCR法對(duì)肺炎鏈球菌5種毒力基因?qū)嵤z測(cè)。結(jié)果：在全部的91株肺炎鏈球菌中LytA、PsaA、NanA、PspA、Ply這5種基因的檢測(cè)陽性率分別為94.5%、85.7%、85.7%、61.5%、82.4%。其中檢出率最高的為L(zhǎng)ytA，其陽性率為94.5%，最低為PspA，其陽性率為61.5%。

從結(jié)果可以看出，5種常見毒力基因在肺炎鏈球菌的分布范圍比較寬廣，能夠?yàn)榈鞍锥嚯囊呙绲难兄谱鳛橘Y料輔助。有些毒力因子，如Ply、PsaA、Psp和lyt，已在動(dòng)物模型中證實(shí)都可誘發(fā)保護(hù)性免疫力。這些抗原可用為載體蛋白或作為與細(xì)胞因子融合蛋白的一部分，其本身也可作為蛋白疫苗[7]。將多種肺炎鏈球菌蛋白質(zhì)混合制成聯(lián)合疫苗、活疫苗及DNA疫苗也是將來研究方向之一。目前，還有眾多疫苗仍在進(jìn)一步的研究與發(fā)展中。